細(xì)胞發(fā)生凋亡時，會激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時抽提DNA進(jìn)行電泳檢測，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder?；蚪MDNA斷裂時，暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上綠色/紅色熒光探針熒光素(FITC/cy3)標(biāo)記的dUTP，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。同理tunel也可行DAB顯色，明場觀察。

實驗步驟：

1.石蠟切片脫蠟入水

2.蛋白酶K修復(fù)

3.孵育Tunel工作液

4.DAPI染核

5.抗熒光猝滅封片劑封片，鏡檢

結(jié)果：

DAPI紫外激發(fā)波長330-380nm，發(fā)射波長420nm，發(fā)藍(lán)光

FITC紫外激發(fā)波長465-495nm， 發(fā)射波長515-555nm，發(fā)綠光

CY3紫外激發(fā)波長510-560，       發(fā)射波長590nm，發(fā)紅光.

CY5紫外激發(fā)波長 608-648nm,   發(fā)射波長672-712，發(fā)橙光