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骨組織含鈣量多,所以脫鈣是制作骨組織切片的重要環(huán)節(jié),尤其需要進行免疫組化的骨組織。為了達到骨組織既充分脫鈣,又保護骨組織的抗原不受破壞,需對骨組織固定之后再脫鈣處理,然后常規(guī)包埋、切片。
我們經(jīng)常會遇到鈣化的樣本,因其組織結(jié)構(gòu)質(zhì)地太硬,妨礙使用常規(guī)方法切片,因此,經(jīng)固定后,必須除去鈣鹽使組織軟化,才能進行常規(guī)切片。
脫鈣周期
名稱 | 周期 |
小鼠骨組織 | 3-5天 |
鈣化樣本 | 3-5天 |
大鼠骨組織 | 7-12天 |
大骨組織樣本 | 根據(jù)骨組織大小 |
步驟
1. 骨或鈣化組織取材固定完全
2. 5-10倍體積脫鈣液
3. 帶組織脫鈣軟化完全
4. 脫水-透明-包埋,切片
注意事項:
1. 請佩戴防護手套。
2. 常溫運輸。
3. 組織塊過大,應根據(jù)需要進行合理修整,避免內(nèi)部脫鈣不足。
4. 如自行脫鈣,須定期觀察脫鈣情況,避免脫鈣過久,致樣本切片染色效果受影響。
5. 注意脫鈣后Von-kossa,茜素紅等染色結(jié)果將會受影響。
骨組織含鈣量多,所以脫鈣是制作骨組織切片的重要環(huán)節(jié),尤其需要進行免疫組化的骨組織。為了達到骨組織既充分脫鈣,又保護骨組織的抗原不受破壞,需對骨組織固定之后再脫鈣處理,然后常規(guī)包埋、切片。
我們經(jīng)常會遇到鈣化的樣本,因其組織結(jié)構(gòu)質(zhì)地太硬,妨礙使用常規(guī)方法切片,因此,經(jīng)固定后,必須除去鈣鹽使組織軟化,才能進行常規(guī)切片。
脫鈣周期
名稱 | 周期 |
小鼠骨組織 | 3-5天 |
鈣化樣本 | 3-5天 |
大鼠骨組織 | 7-12天 |
大骨組織樣本 | 根據(jù)骨組織大小 |
步驟
1. 骨或鈣化組織取材固定完全
2. 5-10倍體積脫鈣液
3. 帶組織脫鈣軟化完全
4. 脫水-透明-包埋,切片
注意事項:
1. 請佩戴防護手套。
2. 常溫運輸。
3. 組織塊過大,應根據(jù)需要進行合理修整,避免內(nèi)部脫鈣不足。
4. 如自行脫鈣,須定期觀察脫鈣情況,避免脫鈣過久,致樣本切片染色效果受影響。
5. 注意脫鈣后Von-kossa,茜素紅等染色結(jié)果將會受影響。