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熒光單標(biāo)是利用抗原抗體特異性結(jié)合原理,在一張切片上的抗原進(jìn)行熒光標(biāo)記的方法。
實(shí)驗(yàn)流程:
石蠟切片脫蠟至水
抗原修復(fù)
封閉
一抗4℃過夜孵育
熒光二抗室溫孵育
DAPI染核
封片-鏡檢.
DAPI紫外激發(fā)波長(zhǎng)330-380nm,發(fā)射波長(zhǎng)420nm,發(fā)藍(lán)光
FITC紫外激發(fā)波長(zhǎng)465-495nm, 發(fā)射波長(zhǎng)515-555nm,發(fā)綠光
CY3紫外激發(fā)波長(zhǎng)510-560, 發(fā)射波長(zhǎng)590nm,發(fā)紅光.
CY5紫外激發(fā)波長(zhǎng) 608-648nm, 發(fā)射波長(zhǎng)672-712,發(fā)橙光
結(jié)果;
細(xì)胞核呈藍(lán)色,陽(yáng)性呈紅色/綠色/橙色。
熒光單標(biāo)是利用抗原抗體特異性結(jié)合原理,在一張切片上的抗原進(jìn)行熒光標(biāo)記的方法。
實(shí)驗(yàn)流程:
石蠟切片脫蠟至水
抗原修復(fù)
封閉
一抗4℃過夜孵育
熒光二抗室溫孵育
DAPI染核
封片-鏡檢.
DAPI紫外激發(fā)波長(zhǎng)330-380nm,發(fā)射波長(zhǎng)420nm,發(fā)藍(lán)光
FITC紫外激發(fā)波長(zhǎng)465-495nm, 發(fā)射波長(zhǎng)515-555nm,發(fā)綠光
CY3紫外激發(fā)波長(zhǎng)510-560, 發(fā)射波長(zhǎng)590nm,發(fā)紅光.
CY5紫外激發(fā)波長(zhǎng) 608-648nm, 發(fā)射波長(zhǎng)672-712,發(fā)橙光
結(jié)果;
細(xì)胞核呈藍(lán)色,陽(yáng)性呈紅色/綠色/橙色。