鬼筆環(huán)肽是一種雙環(huán)七肽，較早發(fā)現(xiàn)的環(huán)狀肽之一，是從鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）中分離出來的。通過結(jié)合和穩(wěn)定纖維狀肌動(dòng)蛋白（F-actin）發(fā)揮功能，并有效防止肌動(dòng)蛋白纖維解聚。由于其與F-肌動(dòng)蛋白的緊密和選擇性結(jié)合，從而顯示微絲骨架在細(xì)胞中的分布。

步驟：

1. 培養(yǎng)好的細(xì)胞爬片，PBS洗滌后4%PFA固定30min。

2. 破膜液覆蓋細(xì)胞，室溫透化細(xì)胞10 min，PBS緩沖液清洗細(xì)胞3次5min。

3. 用組化筆畫圈取100 μL鬼筆環(huán)肽染色工作液完全覆蓋細(xì)胞，37℃避光孵育30 min，PBS緩沖液清洗細(xì)胞3次5 min。

4. DAPI染核10min。

5. 抗熒光猝滅劑封片。

6. 熒光顯微鏡拍照或掃描成像(選擇FITC（Ex/Em=492/518 nm）和DAPI（Ex/Em=364/454 nm）通道)。

注意事項(xiàng)

1. 請(qǐng)佩戴防護(hù)手套。

2. 細(xì)胞爬片冰袋運(yùn)輸。