免疫組化雙標是通過不同的顯色劑，使兩個抗體在一張片子上顯色的方法，同免疫熒光雙標。

 實驗步驟

1. 石蠟切片脫蠟，入水

2. 免疫雙標染色

3. 蘇木素染細胞核

4. 封片，鏡檢

實驗結(jié)果

陽性呈棕色，陽性呈紅色，細胞核成藍色。

注意：

1、不同種屬來源的抗體雙標，兩種抗體間交叉反應(yīng)少，特異性較高，即使細胞內(nèi)抗原量很少也能檢測。

2、抗原定位需要是不同類型細胞的相同或不同部位，或是同一類型細胞的膜+漿、膜+核或漿+核。定位相同細胞的相同或不同部位，顯示顏色不同，對比度不明顯，結(jié)果不清晰(可以做熒光雙標)。

3、進行雙標實驗之前，需要對每種一抗分別進行單獨染色預(yù)實驗，摸索實驗條件，實驗結(jié)果達到預(yù)期后再進行雙標實驗，且前后實驗條件相同。另外要注意的是兩個抗原的修復方法應(yīng)該一致或確定一個抗體的修復對另一個抗體的染色結(jié)果沒有影響。