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沒有顏色非常不利于對組織和細胞的觀察,因此,人們發(fā)明了多種給組織和細胞上色的方法,稱為染色(stain)。其中蘇木精-伊紅染色(HE染色)是常用的染色之一。在HE染色過程中總會出現(xiàn)各種各樣的問題,該如何解決呢?
HE染色后鏡下看到很多小黑點或小水珠似的物質
脫水過程不徹底,造成的水霧殘留;中性樹膠封片前,組織切片已經干涸,此時樹膠不容易滲入組織間,容易殘留細小的氣泡。此時應該用二甲苯徹底脫去封片膠,并重新封片。
不管怎么操作,切片始終無法染色或淡染
這種情況一般因為組織固定時采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補救:防患于未然,要么使用新鮮的中性甲醛固定,要么在存放的甲醛中加一點碳酸鈉中和甲酸。對于已經固定的組織可考慮再次固定。對于已經制出的片子,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時以上,然后自來水漂洗5min,可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,補充染色媒介,增強蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。